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默克蛋白印跡儀的用途及注意事項
更新時間：2023-02-23 瀏覽次數(shù)：1252
蛋白印跡儀被廣泛應(yīng)用于臨床診斷領(lǐng)域，如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源（如病毒或細菌），以及過敏原鑒定。全自動蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關(guān)鍵步驟自動化，尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。
蛋白質(zhì)印跡法，它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
注意事項：
如果出現(xiàn)非特異性的高背景，可觀察僅用二抗單獨處理轉(zhuǎn)印膜所產(chǎn)生的背景強度，若高背景確由二抗產(chǎn)生，可適當(dāng)降低二抗?jié)舛然蚩s短二抗孵育時間;并考慮延長每一步的清洗時間。
一抗與二抗的稀釋度、作用時間和溫度對檢測不同的蛋白要求不同，須經(jīng)預(yù)實驗確定最佳條件。
濾紙/凝膠/轉(zhuǎn)印膜/濾紙夾層組合中不能存在氣泡，可用玻璃棒在夾層組合上滾動將氣泡趕出，以提高轉(zhuǎn)膜效率;上下兩層濾紙不能過大，避免導(dǎo)致直接接觸而引起短路。
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